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微生物檢驗-細菌計數(shù)(二十四)
發(fā)布時間:2022-02-27瀏覽:1314

儀器法

應用儀器測定菌數(shù)是現(xiàn)代菌數(shù)檢測技術(shù)的一種發(fā)展動向。粒子計數(shù)器用于菌數(shù)檢測已有報道,但本法僅適用于無雜質(zhì)顆粒供試液的菌懸液計數(shù),一般不適用于藥品的染菌量檢測,因為任一雜質(zhì)顆粒都會誤計在內(nèi)。下面作扼要介紹∶

粒子計數(shù)器的基本原理:電解溶液經(jīng)過有孔管的微孔時有電流,當任何相對不導電的粒子通過微孔時,微孔內(nèi)電阻增大,使微孔切面上電壓增高,致使兩端電壓發(fā)生變化,通過微孔的每一粒子增大電壓可以被放大、記錄和計數(shù)。細菌細胞則屬不導電的粒子,可被計數(shù)。

粒子計數(shù)器的主體部分為有孔管,其余為電子測量和記錄部分。有孔管的孔徑有10μm、30μm、100μm等,可以根據(jù)粒子大小而選擇。有孔管的一端連結(jié)真空泵與水銀壓力計,水銀壓力計上裝有液量計測的電極接點。測定電極的正極在有孔管內(nèi),負極在燒杯中。測定開始時,將有孔管置入被測菌懸液中,打開真空泵活塞、減壓、菌懸液進有孔管內(nèi),同時水銀壓力計上升。關(guān)閉活塞測定開始,水銀壓力計緩慢向左移動,相應的流人菌懸液。其中計量決定于電極1和2的距離。電壓變化形成脈沖,經(jīng)放大后進入示波器,計數(shù)。

粒子計數(shù)器的計數(shù)能力≥5×104/分,并能在若干秒內(nèi)按顆粒大小決定出分布。粒子計數(shù)器的最大缺點就是它只識別顆粒大小,而不能區(qū)分是否細胞,其次混合各種細胞時,測定誤差較單一菌株為大。

除粒子計數(shù)器外,應用電路的阻抗特性變化,進行細菌總數(shù)測定也有報道。菌數(shù)的檢測還有其他方法,例如比濁法、光密度法、菌體干重法、疊集細胞體積法等,但這些檢測法都要求較大菌量,不太適用于藥品染菌量的測定。